白蛋白啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的白蛋白表達(dá)載體

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811433912.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN109504709A 公開(kāi)（公告）日 2019-03-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN109504709A 申請(qǐng)公布日 2019-03-22
分類號(hào) C12N15/867（2006.01）I; C12N15/113（2010.01）I; C12N5/10（2006.01）I; C07K14/765（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱頌成; 倪華; 趙曉梅 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海安民生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;王永偉
地址 201203 上海市浦東新區(qū)中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蔡倫路781號(hào)810室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了由人血白蛋白啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的用于在細(xì)胞中表達(dá)白蛋白基因的載體，并在細(xì)胞中成功高效表達(dá)外源白蛋白。該表達(dá)載體由骨架和裝載于骨架上的表達(dá)框組成，該表達(dá)框由人血清白蛋白啟動(dòng)子及其第一個(gè)內(nèi)含子、白蛋白基因、內(nèi)核糖體進(jìn)入位點(diǎn)序列(IRES)和標(biāo)記基因組成。該載體中人血白蛋白啟動(dòng)子和IRES序列驅(qū)動(dòng)白蛋白基因和標(biāo)記基因同時(shí)表達(dá)。利用該載體在人細(xì)胞中成功高效表達(dá)重組人血清白蛋白，分泌到培養(yǎng)液中的白蛋白達(dá)到750mg/L，純度超過(guò)90％。該載體為首例用人血白蛋白啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)人血白蛋白基因表達(dá)的載體，也是首例用于人細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)白蛋白的載體。該載體還克服了目的基因與篩選標(biāo)記分用不同啟動(dòng)子的載體系統(tǒng)中在篩選時(shí)的高假陽(yáng)性率和表達(dá)不均衡的問(wèn)題。