白蛋白啟動子驅(qū)動的白蛋白表達(dá)載體

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811433912.2 申請日 -
公開（公告）號 CN109504709B 公開（公告）日 2019-03-22
申請公布號 CN109504709B 申請公布日 2019-03-22
分類號 C12N15/867(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 朱頌成;倪華;趙曉梅 申請（專利權(quán)）人 上海安民生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;王永偉
地址 201203上海市浦東新區(qū)中國（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蔡倫路781號810室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了由人血白蛋白啟動子驅(qū)動的用于在細(xì)胞中表達(dá)白蛋白基因的載體，并在細(xì)胞中成功高效表達(dá)外源白蛋白。該表達(dá)載體由骨架和裝載于骨架上的表達(dá)框組成，該表達(dá)框由人血清白蛋白啟動子及其第一個內(nèi)含子、白蛋白基因、內(nèi)核糖體進(jìn)入位點(diǎn)序列(IRES)和標(biāo)記基因組成。該載體中人血白蛋白啟動子和IRES序列驅(qū)動白蛋白基因和標(biāo)記基因同時表達(dá)。利用該載體在人細(xì)胞中成功高效表達(dá)重組人血清白蛋白，分泌到培養(yǎng)液中的白蛋白達(dá)到750mg/L，純度超過90％。該載體為首例用人血白蛋白啟動子驅(qū)動人血白蛋白基因表達(dá)的載體，也是首例用于人細(xì)胞或哺乳動物細(xì)胞表達(dá)白蛋白的載體。該載體還克服了目的基因與篩選標(biāo)記分用不同啟動子的載體系統(tǒng)中在篩選時的高假陽性率和表達(dá)不均衡的問題。??