AAVS1和H11安全港位點(diǎn)在重組表達(dá)蛋白中的應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010205308.5 申請日 -
公開(公告)號(hào) CN111088282B 公開(公告)日 2020-05-01
申請公布號(hào) CN111088282B 申請公布日 2020-05-01
分類號(hào) C12N15/85(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 朱頌成;趙曉梅;倪華 申請(專利權(quán))人 上海安民生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;田歡
地址 201203上海市浦東新區(qū)中國(上海)自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蔡倫路781號(hào)810室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種AAVS1和H11安全港位點(diǎn)在重組表達(dá)蛋白中的應(yīng)用。所述表達(dá)載體為基于人細(xì)胞基因組AAVS1和H11安全港位點(diǎn)整合的非病毒表達(dá)載體。本發(fā)明首次公開了一種采用人AAVS1和H11安全港單位點(diǎn)整合含多個(gè)啟動(dòng)子分別驅(qū)動(dòng)同一個(gè)基因表達(dá)的多順反子以提高人細(xì)胞重組蛋白表達(dá)水平的方法。成功構(gòu)建了分別含3個(gè)拷貝和2個(gè)拷貝人血白蛋白基因的串聯(lián)表達(dá)盒的重組載體,分別利用人基因組上的AAVS1和H11位點(diǎn)作為整合位點(diǎn)高表達(dá)重組人血白蛋白,并且以人肝細(xì)胞直接作為表達(dá)細(xì)胞,得到的人血清白蛋白更加安全,大大降低了其安全性風(fēng)險(xiǎn)。??