一種高效分泌表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白的生產(chǎn)方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202210337523.X | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN114409745B | 公開(公告)日 | 2022-07-01 |
申請公布號 | CN114409745B | 申請公布日 | 2022-07-01 |
分類號 | C07K14/165(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I | 分類 | 有機化學(xué)〔2〕; |
發(fā)明人 | 毛瑩瑩;顏仁和;李紅衛(wèi);萬鵬飛;仇珍珍;梁鐵坤;李堪賀 | 申請(專利權(quán))人 | 南方醫(yī)科大學(xué) |
代理機構(gòu) | 廣州科沃園專利代理有限公司 | 代理人 | - |
地址 | 510515廣東省廣州市沙太南路1023號-1063號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種高效分泌表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白的生產(chǎn)方法。本發(fā)明通過聚纖維紙片載體利用細(xì)胞生物反應(yīng)器擴增表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白,用含10%胎牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)后,換成含7mM咖啡因、2mM KH2PO4及25?50mg/L硫酸葡聚糖、5mM的丁酸鈉、0.5mM羥乙基淀粉、1mM L?精氨酸的無血清培養(yǎng)基生產(chǎn)表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白,每隔5?7天收集部分培養(yǎng)基并重新加入上述的無血清培養(yǎng)基,并根據(jù)每天細(xì)胞的糖耗補充葡萄糖,使葡萄糖的濃度保持在4g/L。采用本發(fā)明提供的方法有效提高細(xì)胞的表達(dá)水平,降低了疫苗的制造成本,為實現(xiàn)疫苗的規(guī)模化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。 |
