一種檢測(cè)脫靶效應(yīng)方法及其應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011069812.3 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112159838B | 公開（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112159838B | 申請(qǐng)公布日 | 2022-07-01 |
| 分類號(hào) | C12Q1/6869（2018.01）I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 榮知立;林瑛;黃洪新;周家健 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 南方醫(yī)科大學(xué) |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所 | 代理人 | - |
| 地址 | 510515廣東省廣州市白云區(qū)沙太南路1023號(hào)-1063號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本申請(qǐng)公開了一種檢測(cè)脫靶效應(yīng)方法及其應(yīng)用。所述方法涉及一套可以檢測(cè)CRISPR?Cas脫靶效應(yīng)的建庫流程，內(nèi)容包括轉(zhuǎn)染試劑的更換，ODN序列的優(yōu)化，Adaptors的改進(jìn)，Primers的改善和PCR方法的簡(jiǎn)化，以及所述方法在CRISPR/Cas基因編輯系統(tǒng)中的應(yīng)用。一種檢測(cè)CRISPR/Cas系統(tǒng)脫靶效應(yīng)的方法，可以實(shí)現(xiàn)低門檻，高通量，適合更多普通實(shí)驗(yàn)室使用，其測(cè)序儀器不再限制于Miseq，可以是通量更大的Hiseq或Novaseq平臺(tái)。CRISPR/Cas基因編輯系統(tǒng)脫靶效應(yīng)檢測(cè)方法可以實(shí)現(xiàn)各種CRISPR核酸酶（包括高保真等）的特異性檢測(cè)。 |
