用于凋亡細(xì)胞識別和標(biāo)記的融合蛋白及其制備方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810743895.6 申請日 -
公開（公告）號 CN110684115A 公開（公告）日 2020-01-14
申請公布號 CN110684115A 申請公布日 2020-01-14
分類號 C07K19/00;C12N15/65;C12N15/70 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 華子春;高夢月 申請（專利權(quán)）人 南京吉瑞康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 江蘇銀創(chuàng)律師事務(wù)所 代理人 南京吉瑞康生物科技有限公司
地址 210019 江蘇省南京市建鄴區(qū)嘉陵江東街18號03幢6層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物化學(xué)和檢驗(yàn)與檢測領(lǐng)域，具體涉及黃色熒光蛋白標(biāo)記的Annexin A5及其制備方法和在制備凋亡檢測試劑中的應(yīng)用。本發(fā)明以pET28a?Annexin A5?EGFP?his重組質(zhì)粒為模板，構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET28a?Annexin A5?Citrine?his、pET28a?Annexin A5?Venus?his、pET28a?Annexin A5?Ypet?his。大量表達(dá)Annexin A5?Citrine、Annexin A5?Venus和Annexin A5?Ypet融合蛋白，通過Ni柱親和層析純化獲得了這三種蛋白，純度約為90％。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示：Annexin A5?Citrine、Annexin A5?Venus和Annexin A5?Ypet融合蛋白均可以識別和標(biāo)記凋亡細(xì)胞，它們與凋亡細(xì)胞的親和力分別是3113nmol/L，444.3nmol/L和391.6nmol/L。以上結(jié)果顯示Annexin A5?Citrine、Annexin A5?Venus和Annexin A5?Ypet融合蛋白均可以用于凋亡細(xì)胞的識別和標(biāo)記。