一種高細胞毒活性的CIK細胞的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510837518.5 申請日 -
公開(公告)號 CN105274053A 公開(公告)日 2016-01-27
申請公布號 CN105274053A 申請公布日 2016-01-27
分類號 C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 熊桂榮 申請(專利權(quán))人 北京大地同年生物科技有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 100176 北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌北路3號1幢2層102室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高細胞毒活性的CIK細胞的制備方法,包括如下步驟:(1)取患者外周血,收集外周血的單個核細胞部分;(2)將步驟(1)收集的外周血的單個核細胞部分離心,棄去上清液,獲得單個核細胞;(3)取單個核細胞按照1×106/mL細胞,加入含500~2000IU/mLγ干擾素和80~120ng/mL?Turrapubin?A的完全培養(yǎng)基,開始誘導(dǎo)培養(yǎng);其中,完全培養(yǎng)基,包括含體積百分比為10%FBS的RPMI?1640細胞培養(yǎng)液;(4)步驟(3)的細胞培養(yǎng)20~28小時后,加入50~1000ng/mL抗人CD3單克隆抗體和500~2000IU/mL重組人IL-2,繼續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng),其中,每隔2~3天傳代培養(yǎng)一次,整個誘導(dǎo)培養(yǎng)的時間為13~21天,獲得CIK細胞。本發(fā)明提供的制備方法可以獲得高純度、高增殖力和高細胞毒活性的CIK細胞,可用于腫瘤的細胞免疫治療。