一種高細(xì)胞毒活性的CIK細(xì)胞的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510837518.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105274053B 公開(kāi)（公告）日 2019-03-26
申請(qǐng)公布號(hào) CN105274053B 申請(qǐng)公布日 2019-03-26
分類(lèi)號(hào) C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 熊桂榮 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 北京大地同年生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京中知法苑知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 李明
地址 100176 北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)永昌北路3號(hào)1幢2層102室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種高細(xì)胞毒活性的CIK細(xì)胞的制備方法，包括如下步驟：(1)取患者外周血，收集外周血的單個(gè)核細(xì)胞部分；(2)將步驟(1)收集的外周血的單個(gè)核細(xì)胞部分離心，棄去上清液，獲得單個(gè)核細(xì)胞；(3)取單個(gè)核細(xì)胞按照1×106/mL細(xì)胞，加入含500～2000IU/mLγ干擾素和80～120ng/mLTurrapubinA的完全培養(yǎng)基，開(kāi)始誘導(dǎo)培養(yǎng)；其中，完全培養(yǎng)基，包括含體積百分比為10％FBS的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液；(4)步驟(3)的細(xì)胞培養(yǎng)20～28小時(shí)后，加入50～1000ng/mL抗人CD3單克隆抗體和500～2000IU/mL重組人IL?2，繼續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)，其中，每隔2～3天傳代培養(yǎng)一次，整個(gè)誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間為13～21天，獲得CIK細(xì)胞。本發(fā)明提供的制備方法可以獲得高純度、高增殖力和高細(xì)胞毒活性的CIK細(xì)胞，可用于腫瘤的細(xì)胞免疫治療。