高效檢測融合蛋白/抗體Fc段不能介導(dǎo)ADCC和CDC活性的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110233928.4 申請日 -
公開（公告）號 CN112980851A 公開（公告）日 2021-06-18
申請公布號 CN112980851A 申請公布日 2021-06-18
分類號 C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 肖志華;伍小春 申請（專利權(quán)）人 上海奧浦邁生物科技股份有限公司
代理機構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;田歡
地址 201321 上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄28號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域，具體涉及一種高效檢測融合蛋白或者抗體Fc段不能介導(dǎo)產(chǎn)生ADCC和CDC活性的方法。首先公開了一種檢測方法，所述檢測方法能夠快速找到能介導(dǎo)ADCC和CDC效應(yīng)的陽性抗體和陽性細(xì)胞，且能夠直接驗證目標(biāo)蛋白或者抗體的Fc序列不能或者只能微弱介導(dǎo)產(chǎn)生ADCC和CDC效應(yīng)，所述方法包括：S1、載體的構(gòu)建：根據(jù)Rituximab和IgG4的Fc序列進(jìn)行密碼子優(yōu)化，合成目的基因并插入質(zhì)粒中，構(gòu)建瞬轉(zhuǎn)表達(dá)載體；S2、質(zhì)粒抽提和測序；S3、蛋白瞬時表達(dá)；S4、蛋白純化；S5、ADCC和CDC活性分析。本發(fā)明公開的檢測方法也能直接驗證目標(biāo)蛋白或者抗體的Fc段不能或者只能微弱介導(dǎo)產(chǎn)生ADCC和CDC效應(yīng)；檢測方法可靠、適用性廣且高效。