一種肺癌EGFR L858R位點(diǎn)的ddPCR檢測(cè)方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201711231164.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN109762878A 公開(kāi)(公告)日 2019-05-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN109762878A 申請(qǐng)公布日 2019-05-17
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6858(2018.01)I; C12Q1/6886(2018.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳苗苗; 黃昕; 江螢; 童慧娟 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 銘時(shí)醫(yī)療科技(寧波)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海申新律師事務(wù)所 代理人 銘時(shí)基因科技(上海)有限公司
地址 200438 上海市楊浦區(qū)政悅路318號(hào)68幢3266室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種肺癌EGFR L858R位點(diǎn)的ddPCR檢測(cè)方法及應(yīng)用,根據(jù)EGFR基因序列,設(shè)計(jì)一對(duì)包括上游引物和下游引物的擴(kuò)增引物,根據(jù)L858R(2573T>G,COSM6224)突變序列,設(shè)計(jì)檢測(cè)野生型序列的探針和檢測(cè)突變型序列的探針,采用上述引物和探針進(jìn)行ddPCR,針對(duì)ctDNA中的肺癌靶向用藥相關(guān)的重要位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)分析,首先對(duì)肺癌患者外周血漿進(jìn)行DNA抽提,再利用ddPCR技術(shù)檢測(cè)其中EGFR突變位點(diǎn)L858R的突變情況,并以此指導(dǎo)患者用藥。可用于腫瘤的Ⅰ期、Ⅱ期、ⅢA期等早期肺癌診斷,可檢測(cè)0.0625%EGFR基因L858R突變,靈敏度可達(dá)到常規(guī)方法的10倍以上。