一種石蠟包埋樣本中蛋白質(zhì)的提取及檢測(cè)分析方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201910804757.9 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN110501437B | 公開（公告）日 | 2021-03-23 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN110501437B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-03-23 |
| 分類號(hào) | G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I | 分類 | 測(cè)量；測(cè)試; |
| 發(fā)明人 | 陳亞運(yùn);華權(quán)高;李立;趙海義;魯思琴;李如萍;舒芹;張雪嬌 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 武漢金開瑞生物工程有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 武漢藍(lán)寶石專利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） | 代理人 | 嚴(yán)超 |
| 地址 | 430000湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)樓B1樓 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明具體涉及一種石蠟包埋樣本中蛋白質(zhì)的提取及檢測(cè)分析方法。本發(fā)明采用丙酮沉淀法，充分裂解后的蛋白溶液加入冷丙酮和30mM DTT，渦旋混勻，?20℃沉淀，離心時(shí)去掉上清后采用質(zhì)譜更兼容的溶液重懸蛋白，SDS等表面活性劑能夠和蛋白結(jié)合，丙酮沉淀蛋白時(shí)會(huì)一起沉淀下來，所以丙酮沉淀一次只能去掉部分的SDS，待重懸的蛋白進(jìn)行還原烷基化后，再次加入冷丙酮和10mM DTT，?20℃沉淀，離心去掉上清后再次采用質(zhì)譜更兼容的溶液重懸蛋白，經(jīng)過兩次丙酮沉淀與裂解液重懸置換，SDS對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響基本消除，并且每個(gè)樣品只需3ml左右的丙酮，成本大約0.1元，相較于超濾管，節(jié)省了更多成本。?? |
