一種目的基因片段的合成方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011210492.9 申請日 -
公開（公告）號 CN112481285A 公開（公告）日 2021-03-12
申請公布號 CN112481285A 申請公布日 2021-03-12
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳羽西;曹志雄;顏中南;朱英宏 申請（專利權）人 武漢金開瑞生物工程有限公司
代理機構 北京眾達德權知識產權代理有限公司 代理人 江慧
地址 430206湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道818號高科醫(yī)療器械園B11號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種目的基因片段的合成方法，所述方法包括：獲得目的基因片段的多條上游引物和多條下游引物；將所述多條上游引物、所述多條下游引物和雙蒸水混勻，獲得引物對溶液；將所述引物對溶液、PCR Buffer和ddH2O混勻，獲得退火反應液；將所述退火反應液放置于溫度為95～105℃的熱水中，后自然冷卻至室溫，獲得退火產物；將載體雙酶切、后用T4 DNA聚合酶處理，獲得第二粘性末端的線性載體；將所述退火產物和所述更長粘性末端的線性載體孵育，后轉化進感受態(tài)細胞，獲得帶有目的基因片段的轉化子。該方法合成效率高且正確率高，適合高度重復、高GC、發(fā)卡等特殊結構序列的目的基因片段的合成。??