一種丙氨酸脫氫酶突變體及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810033877.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN107937361B 公開（公告）日 2019-02-12
申請(qǐng)公布號(hào) CN107937361B 申請(qǐng)公布日 2019-02-12
分類號(hào) C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 齊俊平;張帆;劉佳;劉立明 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 金華利家園生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 張勇
地址 321000 浙江省金華市婺城區(qū)金西南區(qū)D-09-04地塊
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種丙氨酸脫氫酶突變體及其應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過蛋白質(zhì)工程改造嗜熱古細(xì)菌(Archaeoglobus fulgidus)來源丙氨酸脫氫酶，使其最適酶活溫度由82℃降至50℃，在大腸桿菌K12中刪除L?丙氨酸合成競(jìng)爭(zhēng)路徑上的關(guān)鍵基因，減少副產(chǎn)物生產(chǎn)，重組菌株中的編碼L?丙氨酸脫氫酶alaD基因和丙氨酸消旋酶dadX基因替換為改造后的嗜熱古細(xì)菌來源的丙氨酸脫氫酶基因，利用該重組菌株進(jìn)行在發(fā)酵罐中進(jìn)行兩階段發(fā)酵，發(fā)酵42h，L?丙氨酸產(chǎn)量達(dá)到153.9g/L，糖酸轉(zhuǎn)化率81.0％。