一種microRNA定量檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210153449.2 申請日 -
公開（公告）號 CN102676677A 公開（公告）日 2012-09-19
申請公布號 CN102676677A 申請公布日 2012-09-19
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李啟靖 申請（專利權(quán)）人 天津曠博同生生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 100176 北京市大興區(qū)亦莊經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)地盛東路1號愛普益大廈2幢3層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種microRNA定量檢測方法，包括如下步驟：（1）提取樣本的總RNA；（2）用polyA聚合酶處理總RNA，使miRNA的3’端加上一段polyA尾巴；（3）用5’端含有接頭序列的oligo(dT)反轉(zhuǎn)錄引物進行反轉(zhuǎn)錄，使得到的第一鏈cDNA加上一段接頭；（4）使用待測miRNA序列特異性正向引物和與所述接頭序列互補的通用反向引物進行定量實時PCR擴增，其中，所述通用反向引物是長度不同的兩種反向引物的混合物。本發(fā)明的方法可以對miRNA的表達進行定量檢測和分析，大大提高了現(xiàn)有檢測方法的特異性、靈敏性和重復(fù)性。