一種以基因工程水稻表達(dá)和制備重組瑞替普酶的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110735731.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113337493A 公開(kāi)（公告）日 2021-09-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN113337493A 申請(qǐng)公布日 2021-09-03
分類(lèi)號(hào) C12N9/64（2006.01）I;C12N15/84（2006.01）I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊代常;余文卉 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 武漢禾元生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京律誠(chéng)同業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 黃韌敏
地址 430000湖北省武漢市東湖開(kāi)發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種經(jīng)水稻密碼子優(yōu)化的重組瑞替普酶基因，相關(guān)載體及制備基因工程水稻種子的方法和重組瑞替普酶分離純化方法。將基因工程稻谷加工粉碎后與提取緩沖液混合，提取過(guò)濾后得到含重組瑞替普酶的粗提取物；分離純化步驟依次包括：1）將含重組瑞替普酶的粗提取物進(jìn)行陽(yáng)離子交換層析，得到初級(jí)產(chǎn)物I；2）將初級(jí)產(chǎn)物I進(jìn)行疏水層析，得到中間產(chǎn)物II；3）將中間產(chǎn)物II進(jìn)行苯甲脒親和層析，得到純化的重組瑞替普酶。該方法無(wú)需體外復(fù)性，安全性高，容易規(guī)?；@得的重組瑞替普酶達(dá)到98％以上的HPLC純度。