一種重組蛋白酶K工業(yè)化純化及凍干方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010960308.6 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114181925A 公開（公告）日 2022-03-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN114181925A 申請(qǐng)公布日 2022-03-15
分類號(hào) C12N9/58（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 占全;楊代常 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢禾元生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京律誠同業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 黃韌敏;魏紫
地址 430000湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組蛋白酶K工業(yè)化純化及凍干方法。將畢赤酵母表達(dá)的重組蛋白酶K發(fā)酵液澄清過濾后加入稀釋液稀釋，并經(jīng)過超濾步驟進(jìn)行濃縮和透析，獲得含微量金屬離子和色素的蛋白酶K透析液，將該透析液經(jīng)過陽離子交換層析分離純化，獲得含重組蛋白酶K的洗脫液；將含重組蛋白酶K的洗脫液放在室溫結(jié)晶沉淀4?6h，攪拌混勻后倒入正壓過濾裝置中，壓濾獲得蛋白酶K濾餅；該濾餅復(fù)溶后，加入凍干賦形劑，按照優(yōu)化的凍干工藝進(jìn)行凍干，分包裝后獲得蛋白酶K成品。該方法工藝步驟簡(jiǎn)單、收率高、成本低，易于工業(yè)化放大生產(chǎn)。所獲得的蛋白酶K目標(biāo)物產(chǎn)量高、活性好。