一種利用基因工程水稻表達人糜蛋白酶原和制備重組人糜蛋白酶的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011156258.2 申請日 -
公開（公告）號 CN114480354A 公開（公告）日 2022-05-13
申請公布號 CN114480354A 申請公布日 2022-05-13
分類號 C12N9/76（2006.01）I;C12N15/57（2006.01）I;C12N15/82（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊代常;董亮亮;李坤鵬;尹恒 申請（專利權(quán)）人 武漢禾元生物科技股份有限公司
代理機構(gòu) 北京律誠同業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 -
地址 430000湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高效表達人糜蛋白酶原的基因工程水稻稻谷的制備方法及從表達人糜蛋白酶原的基因工程稻谷制備重組人糜蛋白酶的方法。將高效表達經(jīng)水稻密碼子優(yōu)化的人糜蛋白酶原基因的基因工程稻谷加工粉碎后與提取緩沖液混合，提取過濾后得到含重組人糜蛋白酶原的粗提取物；將含重組人糜蛋白酶原的粗提取物經(jīng)過陽離子交換層析和陰離子交換層析，獲得重組人糜蛋白酶原純化目標(biāo)物。該重組人糜蛋白酶原用胰蛋白酶激活，冷凍干燥后獲得重組人糜蛋白酶。該方法操作簡單，無動物源性材料，獲得的糜蛋白酶純度和活性高，成本低，易于工業(yè)化放大。