一種細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201610247501.9 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(kāi)(公告)號(hào) | CN105838664B | 公開(kāi)(公告)日 | 2016-08-10 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN105838664B | 申請(qǐng)公布日 | 2016-08-10 |
分類(lèi)號(hào) | C12N5/071(2010.01)I | 分類(lèi) | - |
發(fā)明人 | 張暉;張靜;陳超 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 深圳未名新鵬生物醫(yī)藥有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 陳劍聰 |
地址 | 518000廣東省深圳市南山區(qū)西麗街道高新北二道18號(hào) | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明提出了一種細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)馴化攜帶有編碼人血小板生成素基因序列的CHO細(xì)胞株適應(yīng)化學(xué)限定培養(yǎng)基,篩選獲得高表達(dá)重組人血小板生成素的單克隆細(xì)胞株,并建立原始細(xì)胞庫(kù)、主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù);(2)工程細(xì)胞的懸浮培養(yǎng),包括種子復(fù)蘇、細(xì)胞擴(kuò)增、細(xì)胞接種以及懸浮流加培養(yǎng),然后收獲上清液;懸浮流加培養(yǎng)包括添加物的優(yōu)化、流加補(bǔ)料的篩選以及流加方法的優(yōu)化。本發(fā)明培養(yǎng)出的細(xì)胞密度高、容易放大、生產(chǎn)周期短、表達(dá)量高,收獲生產(chǎn)重組人血小板生成素發(fā)酵液。?? |
