一種細胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610247501.9 申請日 -
公開（公告）號 CN105838664B 公開（公告）日 2016-08-10
申請公布號 CN105838664B 申請公布日 2016-08-10
分類號 C12N5/071(2010.01)I 分類 -
發(fā)明人 張暉;張靜;陳超 申請（專利權(quán)）人 深圳未名新鵬生物醫(yī)藥有限公司
代理機構(gòu) 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產(chǎn)權(quán)代理事務所（普通合伙） 代理人 陳劍聰
地址 518000廣東省深圳市南山區(qū)西麗街道高新北二道18號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出了一種細胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)馴化攜帶有編碼人血小板生成素基因序列的CHO細胞株適應化學限定培養(yǎng)基，篩選獲得高表達重組人血小板生成素的單克隆細胞株，并建立原始細胞庫、主細胞庫和工作細胞庫；(2)工程細胞的懸浮培養(yǎng)，包括種子復蘇、細胞擴增、細胞接種以及懸浮流加培養(yǎng)，然后收獲上清液；懸浮流加培養(yǎng)包括添加物的優(yōu)化、流加補料的篩選以及流加方法的優(yōu)化。本發(fā)明培養(yǎng)出的細胞密度高、容易放大、生產(chǎn)周期短、表達量高，收獲生產(chǎn)重組人血小板生成素發(fā)酵液。??