一種細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610247501.9 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105838664A 公開(kāi)（公告）日 2016-08-10
申請(qǐng)公布號(hào) CN105838664A 申請(qǐng)公布日 2016-08-10
分類號(hào) C12N5/071(2010.01)I;C12N5/02(2006.01)I;C07K14/475(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張暉;張靜;陳超 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳未名新鵬生物醫(yī)藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 陳劍聰
地址 518057 廣東省深圳市南山區(qū)高新北區(qū)朗山二路新鵬生物園
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出了一種細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)重組人血小板生成素的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)馴化攜帶有編碼人血小板生成素基因序列的CHO細(xì)胞株適應(yīng)化學(xué)限定培養(yǎng)基，篩選獲得高表達(dá)重組人血小板生成素的單克隆細(xì)胞株，并建立原始細(xì)胞庫(kù)、主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)；(2)工程細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)，包括種子復(fù)蘇、細(xì)胞擴(kuò)增、細(xì)胞接種以及懸浮流加培養(yǎng)，然后收獲上清液；懸浮流加培養(yǎng)包括添加物的優(yōu)化、流加補(bǔ)料的篩選以及流加方法的優(yōu)化。本發(fā)明培養(yǎng)出的細(xì)胞密度高、容易放大、生產(chǎn)周期短、表達(dá)量高，收獲生產(chǎn)重組人血小板生成素發(fā)酵液。