外泌體RNA的高通量測(cè)序文庫的構(gòu)建方法及裝置、用途

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010336574.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN111501106A 公開（公告）日 2020-08-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN111501106A 申請(qǐng)公布日 2020-08-07
分類號(hào) C40B50/06;C40B40/06;C40B60/08;C12Q1/6869;C12Q1/6883 分類 -
發(fā)明人 楊玲;管彥芳;張燕艷;姬利延;賈明璽 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京吉因加科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京三聚陽光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 成珊
地址 北京市昌平區(qū)中關(guān)村科技園區(qū)昌平園生命園路8號(hào)院一區(qū)6號(hào)-2至12層101(6號(hào)樓9層901)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種外泌體RNA的高通量測(cè)序文庫的構(gòu)建方法，包括：提取外泌體的總RNA；將總RNA進(jìn)行片段化處理，得到片段化的RNA；將片段化的RNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈cDNA；在雙鏈cDNA的5’端和3’端連接測(cè)序接頭，得到接頭連接產(chǎn)物；PCR擴(kuò)增接頭連接產(chǎn)物，得到富集的接頭連接產(chǎn)物；從富集的接頭連接產(chǎn)物中分離單鏈DNA，將單鏈DNA進(jìn)行環(huán)化處理，獲得環(huán)狀DNA，環(huán)狀DNA構(gòu)成外泌體RNA的高通量測(cè)序文庫。上述構(gòu)建方法能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低起始量的外泌體RNA的測(cè)序文庫的構(gòu)建，測(cè)序結(jié)果廣泛覆蓋mRNA、miRNA、lncRNA等各類RNA，在疾病早期診斷、預(yù)后評(píng)估、療效監(jiān)測(cè)及治療方法研究等方面具有重要價(jià)值。