一種自內裂解大腸桿菌的裂解酶及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510197003.3 申請日 -
公開（公告）號 CN104762285A 公開（公告）日 2015-07-08
申請公布號 CN104762285A 申請公布日 2015-07-08
分類號 C12N9/88(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 危宏平;楊航;余軍平 申請（專利權）人 武漢樂斯吉生物科技有限公司
代理機構 武漢科皓知識產權代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 汪俊鋒
地址 430075 湖北省武漢市武漢市高新大道666號光谷生物城B7棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種自內裂解大腸桿菌的裂解酶及其應用。本發(fā)明采用基因拼接的手段，構建了一個全新的裂解酶ClyN，該酶在大腸桿菌中表達后能導致宿主大腸桿菌的自裂解，釋放出胞內表達的ATP和蛋白質。重組蛋白ClyN表達質粒能很好的在大腸桿菌BL21(DE3)中復制，在IPTG的誘導下表達15?min后即可觀察到明顯的誘導大腸桿菌自裂解的現(xiàn)象，誘導裂解效率為99.8%。當宿主細菌中表達有異源增強型綠色熒光蛋白（EGFP）時，EGFP會在大腸桿菌裂解后釋放到溶液中，且其釋放效率是直接超聲破碎效率的89%。因此，ClyN能用于異源蛋白在大腸桿菌中表達后的提取與釋放，具有廣大的應用前景。