一種通過DNA合成改組組合突變獲得的ω-轉(zhuǎn)氨酶突變體及應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011415007.1 申請日 -
公開（公告）號 CN112481230B 公開（公告）日 2021-12-07
申請公布號 CN112481230B 申請公布日 2021-12-07
分類號 C12N9/10（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P7/26（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃俊;劉春燕;梅樂和;陳海濱;呂常江;胡升;王宏鵬;趙偉睿;樊芳芳;李業(yè);于林凱;周一峰 申請（專利權(quán)）人 寧波酶賽生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 沈金龍
地址 310023浙江省杭州市西湖區(qū)留和路318號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種通過DNA合成改組組合突變獲得的ω?轉(zhuǎn)氨酶突變體，由來自土曲霉（Aspergillus terreus）的野生型ω?轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)行點(diǎn)突變而得，野生型ω?轉(zhuǎn)氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述ω?轉(zhuǎn)氨酶突變體的突變位點(diǎn)為以下任意一種：（1）F115L?H210N?M150C?M280C；（2）F115L?H210N；（3）F115L?H210N?E253A?I295V；（4）I77L?F115L?E133A?H210N?N245D；（5）I77L?Q97E?F115L?L118T?E253A?G292D；（6）I77L?E133A?N245D?G292D；（7）H210N?N245D?E253A?G292D。本發(fā)明通過DNA合成改組組合突變方法，將前期所得到的正向突變隨機(jī)組合，通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，該方法可有效地提高正突變概率，提高實(shí)驗(yàn)效率及可行性，并篩選得到熱力學(xué)穩(wěn)定性明顯優(yōu)于野生酶的突變酶。