一種基于高通量測序同時檢測T細胞和B細胞免疫組庫的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201611202242.4 申請日 -
公開（公告）號 CN106755410B 公開（公告）日 2019-12-06
申請公布號 CN106755410B 申請公布日 2019-12-06
分類號 C12Q1/6869（2018.01）; C12Q1/6806（2018.01）; C12N15/10（2006.01）; C40B50/06（2006.01） 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 孫濤; 劉瀟 申請（專利權(quán)）人 杭州艾沐蒽生物科技有限公司
代理機構(gòu) 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 孫濤;杭州艾沐蒽生物科技有限公司
地址 610072 四川省成都市青羊區(qū)大慶路91號2棟1單元10號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于分子生物學(xué)檢測領(lǐng)域，特別是涉及一種基于高通量測序同時檢測T細胞和B細胞免疫組庫的方法，包括獲取人血液樣本10mL于EDTA抗凝管、利用淋巴細胞分離液Ficoll?1077進行外周血單核細胞（PBMC）的分離、利用Trizol的方法提取PBMC的總RNA，所用試劑為RNAzol RT、RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，并同時在cDNA 5’端添加接頭、PCR1、PCR2和純化和進行高通量測序等步驟。通過從接頭的上游引物到C區(qū)的下游引物，獲得淋巴細胞中TCR（Alpha鏈或Beta鏈）和BCR（Heavy鏈或Light鏈）的基因序列的全長信息。