一種捕獲文庫構(gòu)建方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010573877.5 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN111690988A 公開(公告)日 2020-09-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN111690988A 申請(qǐng)公布日 2020-09-22
分類號(hào) C40B50/06(2006.01)I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 覃振東;王梁輝;楊敬敏;高鵬飛;唐嘉婕 申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海韋翰斯生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 代理人 上海韋翰斯生物醫(yī)藥科技有限公司
地址 201318上海市浦東新區(qū)康新公路3399弄25號(hào)534室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種捕獲文庫構(gòu)建方法,至少包括以下步驟:1)將片段化的DNA與接頭連接,獲得預(yù)文庫;2)利用擴(kuò)增引物對(duì)預(yù)文庫進(jìn)行擴(kuò)增,獲得富集文庫;所述擴(kuò)增引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物或下游引物的一端設(shè)有修飾基團(tuán);或者,所述上游引物和下游引物的一端同時(shí)設(shè)有不同的修飾基團(tuán);所述富集文庫中包括雙鏈DNA;3)使用核酸酶消化所述富集文庫,使得所述富集文庫中的雙鏈DNA的一條單鏈被消化;4)在不存在接頭封閉序列或存在低于正常工作體積的接頭封閉序列的情況下,將步驟3)獲得的產(chǎn)物與雜交探針進(jìn)行雜交捕獲,獲得捕獲文庫。本發(fā)明可以在不加或減少封閉序列的前提下,保持較好的捕獲效率,顯著降低測(cè)序成本。??