一種微量DNA的定量方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911082549.9 申請日 -
公開（公告）號 CN110791554A 公開（公告）日 2020-02-14
申請公布號 CN110791554A 申請公布日 2020-02-14
分類號 C12Q1/6851 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 唐嘉婕;李文濤;徐輝;楊敬敏 申請（專利權(quán)）人 上海韋翰斯生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機構(gòu) 上海光華專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 上海韋翰斯生物醫(yī)藥科技有限公司
地址 201318 上海市浦東新區(qū)康新公路3399弄25號534室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種微量DNA的定量方法，至少包括以下步驟：設(shè)計內(nèi)標(biāo)模板；設(shè)計能夠同時擴增目標(biāo)模板和內(nèi)標(biāo)模板的引物對；利用所述引物對，將待測DNA序列和內(nèi)標(biāo)模板混合后進行PCR擴增；將擴增產(chǎn)物用二代測序平臺對應(yīng)的接頭引物對進行再次擴增，獲得二代測序文庫；對所述二代測序文庫進行二代測序平臺測序；根據(jù)公式待測DNA的拷貝數(shù)=C*A1/A2，計算得目標(biāo)模板的拷貝數(shù)，即為待測DNA的拷貝數(shù)；其中，C為內(nèi)標(biāo)模板的拷貝數(shù)；A1為目標(biāo)模板序列的測序覆蓋深度；A2為內(nèi)標(biāo)模板序列的測序覆蓋深度。本發(fā)明不僅可以準(zhǔn)確定量微量DNA，還可以直接讀取目標(biāo)DNA模板的序列，定量結(jié)果準(zhǔn)確性不受非特異性擴增的影響。