酶法生產(chǎn)煙酰胺單核苷酸的方法和用于該方法的轉(zhuǎn)化體

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110290561.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113005162A 公開（公告）日 2021-06-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN113005162A 申請(qǐng)公布日 2021-06-22
分類號(hào) C12P19/30;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/54;C12N15/56;C12N9/10;C12N9/24;C12N9/12 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李倩;李晚軍;唐德強(qiáng);劉鵬 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 綿陽晟氏健康科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都行之專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 唐邦英
地址 621000 四川省綿陽市北川羌族自治縣永昌鎮(zhèn)蔣家河路33號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種酶法生產(chǎn)煙酰胺單核苷酸的方法和用于該方法的轉(zhuǎn)化體，一種酶法生產(chǎn)煙酰胺單核苷酸的方法，包括以下步驟：S1、分別構(gòu)建重組表達(dá)載體pET15b?nadV、重組表達(dá)載體pET28a（+）?Amn和重組表達(dá)載體pET28a（+）?Prs，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，獲得重組工程菌nadV、重組工程菌Amn和重組工程菌Prs；S2、分別發(fā)酵表達(dá)重組工程菌nadV、重組工程菌Amn和重組工程菌Prs，獲得濕菌體；S3、分別對(duì)三種濕菌體進(jìn)行破碎處理，獲得三種粗酶液；S4、將三種粗酶液與煙酰胺、ATP、AMP、MgCl2、KCl和Tris?HCl緩沖液混合，攪拌均勻后進(jìn)行反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度為30?50℃，維持pH值為6.5?8.5，反應(yīng)2?8小時(shí)獲得煙酰胺單核苷酸粗產(chǎn)品。本發(fā)明不使用價(jià)格較高且來源受限的底物作為起始原料，價(jià)格低廉、綠色環(huán)保，適宜大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。