一種提高基因編輯效率的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811318178.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN111154801A 公開（公告）日 2020-05-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN111154801A 申請(qǐng)公布日 2020-05-15
分類號(hào) C12N15/85;C12N15/90 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 靖超 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢纖然生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 武漢纖然生物科技有限公司
地址 430000 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)（九峰創(chuàng)新）基地B4棟三層C207-208
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種提高基因編輯效率的方法，包括以下步驟：(1)針對(duì)目的基因，構(gòu)建上游TALEN質(zhì)粒和下游TALEN質(zhì)粒；(2)構(gòu)建單鏈同源重組基因序列片段；(3)將上游TALEN質(zhì)粒、下游TALEN質(zhì)粒和單鏈同源重組基因序列片段以一定的比例轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞并篩選陽性單克隆。本發(fā)明選擇低脫靶效應(yīng)TALEN技術(shù)，將體外構(gòu)建的同源重組基因序列制成單鏈DNA，使得限制性內(nèi)切酶不能識(shí)別其序列而不能對(duì)其進(jìn)行切割，從而延長(zhǎng)其在體內(nèi)的降解時(shí)間，提高該序列發(fā)生同源重組效率的幾率，從而提高基因編輯效率；與此同時(shí)，同源重組基因序列經(jīng)特定修飾后，獲得的陽性單克隆增加。