一種在MDCK全懸浮細(xì)胞上增殖禽流感病毒的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810551857.0 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN108753737A 公開(公告)日 2018-11-06
申請(qǐng)公布號(hào) CN108753737A 申請(qǐng)公布日 2018-11-06
分類號(hào) C12N7/00;C12N5/071;C12N5/02 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳宏;王博;趙博;崔凱;黃琳;沈玥;李莉;杜鑫;張麗娜;金燕斌;朱長(zhǎng)動(dòng) 申請(qǐng)(專利權(quán))人 吉林冠界生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 吉林冠界生物技術(shù)有限公司
地址 134000 吉林省通化市梅河口市曙光鎮(zhèn)羅家村
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種在MDCK全懸浮細(xì)胞上增殖禽流感病毒的方法及其應(yīng)用。所述方法包括:將MDCK細(xì)胞全懸浮培養(yǎng)至7.0×106~1.0×107cells/mL時(shí),按MOI=0.001~0.0001接種雞胚禽流感病毒;接毒后在pH值6.9~7.3、溶氧30~60%、溫度32~37℃的環(huán)境下培養(yǎng),當(dāng)病毒達(dá)到足夠高的滴度后分離并提純病毒粒子。本方法由于種毒無(wú)需循環(huán),因而縮短了生產(chǎn)周期,且種毒變異風(fēng)險(xiǎn)大大降低。通過(guò)本發(fā)明提供的方法培養(yǎng)重組禽流感病毒的HA能夠達(dá)到1:1024,每1ml病毒含量≥108.0TCID50,每0.1ml病毒含量≥108.0TCID50,而種毒的接入量量減少10倍以上。