人CD3+CD56+CIK細(xì)胞的制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201511030744.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN106929472A 公開（公告）日 2017-07-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN106929472A 申請(qǐng)公布日 2017-07-07
分類號(hào) C12N5/0783 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 崔博靖;付凡;饒秀茸;馬飛;王宇環(huán) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市合一康生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 518000 廣東省深圳市福田區(qū)福保街道福田保稅區(qū)盈福高科技廠房七層B廠房、辦公用房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人CD3+CD56+CIK細(xì)胞的制備方法，采用步驟：（1）采集患者外周靜脈血，經(jīng)聚蔗糖-泛影葡糖胺密度梯度離心獲得單個(gè)核細(xì)胞；（2）將上述PBMCs重懸于含自體滅活血漿的商品化無血清培養(yǎng)基中，調(diào)整細(xì)胞密度1-2×106/ml，并加入IFN-γ至終濃度600-1000IU/ml，最后轉(zhuǎn)移入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)進(jìn)行培養(yǎng)；（3）培養(yǎng)12-24小時(shí)后加入抗CD3單抗、抗CD28單、IL-2、IL-15，連續(xù)培養(yǎng)14~21天，其中每2~3天補(bǔ)加含有IL-2和IL-15的新鮮培養(yǎng)基，使補(bǔ)加培養(yǎng)基后的細(xì)胞密度控制在1~2×106/ml。本發(fā)明利用抗CD3單抗作為刺激劑，激活CIK細(xì)胞，并聯(lián)合細(xì)胞因子rh?rh?IL-15和rh?IL-2共同刺激。從而為臨床過繼性免疫細(xì)胞治療提供新的可選方案。