人CD3+CD56+CIK細胞的制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201511030744.9 申請日 -
公開(公告)號 CN106929472A 公開(公告)日 2017-07-07
申請公布號 CN106929472A 申請公布日 2017-07-07
分類號 C12N5/0783 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 崔博靖;付凡;饒秀茸;馬飛;王宇環(huán) 申請(專利權(quán))人 深圳市合一康生物科技股份有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 518000 廣東省深圳市福田區(qū)福保街道福田保稅區(qū)盈福高科技廠房七層B廠房、辦公用房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人CD3+CD56+CIK細胞的制備方法,采用步驟:(1)采集患者外周靜脈血,經(jīng)聚蔗糖-泛影葡糖胺密度梯度離心獲得單個核細胞;(2)將上述PBMCs重懸于含自體滅活血漿的商品化無血清培養(yǎng)基中,調(diào)整細胞密度1-2×106/ml,并加入IFN-γ至終濃度600-1000IU/ml,最后轉(zhuǎn)移入培養(yǎng)瓶內(nèi)進行培養(yǎng);(3)培養(yǎng)12-24小時后加入抗CD3單抗、抗CD28單、IL-2、IL-15,連續(xù)培養(yǎng)14~21天,其中每2~3天補加含有IL-2和IL-15的新鮮培養(yǎng)基,使補加培養(yǎng)基后的細胞密度控制在1~2×106/ml。本發(fā)明利用抗CD3單抗作為刺激劑,激活CIK細胞,并聯(lián)合細胞因子rh?rh?IL-15和rh?IL-2共同刺激。從而為臨床過繼性免疫細胞治療提供新的可選方案。