一種用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細菌的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910592746.9 申請日 -
公開（公告）號 CN111718961B 公開（公告）日 2022-02-08
申請公布號 CN111718961B 申請公布日 2022-02-08
分類號 C12N15/87（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王洪琦;林繼偉 申請（專利權(quán)）人 華大青蘭生物科技（無錫）有限公司
代理機構(gòu) 北京華睿卓成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 唐莉
地址 214200江蘇省無錫市宜興市新街街道興業(yè)路298號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細菌的方法，該方法能夠提高細菌轉(zhuǎn)化效率。該方法是利用不同形態(tài)的質(zhì)粒在溫度變化時的不同表現(xiàn)來達到去除非目標質(zhì)粒的目的，從而提高目標質(zhì)粒的比率。在細菌轉(zhuǎn)化時，轉(zhuǎn)化用的環(huán)狀質(zhì)粒有兩種形態(tài)，一種是開環(huán)質(zhì)粒，一種是閉環(huán)質(zhì)粒。在高溫變性處理后，開環(huán)質(zhì)粒的兩條鏈會徹底分離成兩條單鏈，而在隨后的快速復(fù)性時無法有效恢復(fù)，而閉環(huán)質(zhì)粒的兩條鏈雖然也會分開，但會在隨后的復(fù)性過程中快速恢復(fù)，而單鏈的質(zhì)粒無法有效轉(zhuǎn)化細菌。如果目標質(zhì)粒是閉環(huán)質(zhì)粒，那么高溫變性處理可以有效提高閉環(huán)質(zhì)粒在轉(zhuǎn)化體系中的比例，從而降低隨后篩選克隆的工作量。