一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110380864.7 申請日 -
公開（公告）號 CN103131724B 公開（公告）日 2015-02-25
申請公布號 CN103131724B 申請公布日 2015-02-25
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丘小慶 申請（專利權）人 北京亦科信息菌素研究院有限公司
代理機構 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 代理人 畿晉慶三聯(lián)（北京）生物技術有限公司
地址 100095 北京市海淀區(qū)蘇家坨前沙澗村1000米
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明“一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及應用”，屬于生物制藥工程。該方法包括如下步驟：(1)重組突變質粒轉染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽性單克隆菌落，(2)對陽性單克隆菌落進行增菌得到種子菌液，誘導所述種子菌液大量增菌生長，(3)分離含有表達的目的重組蛋白的菌體上清液，提純菌體上清液中的重組蛋白，其特征在于：所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli?B834(DE3)。本發(fā)明還進一步對大量增菌培養(yǎng)基的成分及蛋白質純化步驟進行了優(yōu)化，在蛋白質產量和純度上都得到了明顯的提高。使本發(fā)明的方法適合于應用在大腸桿菌工程菌表達重組蛋白的規(guī)?；a中。