單分子探針多重靶向捕獲文庫的構(gòu)建方法及應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010983954.4 申請日 -
公開（公告）號 CN112063690A 公開（公告）日 2020-12-11
申請公布號 CN112063690A 申請公布日 2020-12-11
分類號 C12Q1/6806(2018.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 段小紅;張騰龍;楊春燕;楊文娟;李旋;王東亮;周啟明 申請（專利權(quán)）人 北京求臻醫(yī)學(xué)檢驗實驗室有限公司
代理機構(gòu) 重慶百潤洪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京求臻醫(yī)學(xué)檢驗實驗室有限公司
地址 100000北京市經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)經(jīng)海四路156號院3號樓3層301
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及分子檢測的技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及單分子探針多重靶向捕獲文庫的構(gòu)建方法及應(yīng)用；包括以下步驟：根據(jù)靶目標(biāo)區(qū)域序列設(shè)計并合成分子倒置探針；針對捕獲的目標(biāo)區(qū)域，靶序列互補區(qū)域探針A和靶序列互補區(qū)域探針B可特異性與目標(biāo)區(qū)域模板互補結(jié)合，形成含有一個核苷酸至幾百個核苷酸缺口的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；然后加入4種游離的核苷酸，在DNA聚合酶的作用下以靶目標(biāo)序列為模板填補缺口，DNA連接酶催化探針區(qū)域兩端的3’，5’?磷酸二酯鍵，形成完整的環(huán)化探針；用PCR擴增直接產(chǎn)生靶向區(qū)域的測序文庫，此時的PCR擴增產(chǎn)物即為測序文庫。本發(fā)明在傳統(tǒng)的MIP技術(shù)基礎(chǔ)上做了優(yōu)化和改進，用于腫瘤相關(guān)的低頻變異和甲基化的檢測。??