一種分離提取糜蛋白酶的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200810115987.6 申請日 -
公開（公告）號 CN101302505B 公開（公告）日 2010-12-08
申請公布號 CN101302505B 申請公布日 2010-12-08
分類號 C12N9/64(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 呂向廣 申請（專利權(quán)）人 北京格源天潤生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京中創(chuàng)陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司 代理人 尹振啟
地址 102609 北京市大興區(qū)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)基地天府路3號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種分離提取糜蛋白酶的方法，包括：將牛胰腺粉碎、過濾，提取濾液；對濾液去除雜蛋白，精制濃縮；加入硫酸銨并用氫氧化鈉調(diào)pH值進行培養(yǎng)使糜蛋白酶原析出結(jié)晶；對上述培養(yǎng)物進行抽濾，提取出糜蛋白酶原，培養(yǎng)物抽濾液回收待用，加入胰蛋白酶使其酶解激活，經(jīng)過濾后得第一半成品溶液；用CM-sopharoseFF凝膠介質(zhì)裝層析柱，用乙酸緩沖液進行平衡，平衡后用培養(yǎng)物抽濾液上樣，用平衡液洗柱，洗至流出液OD 280值小于0.1，換用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液洗脫，收集洗脫峰，所得溶液即為第二半成品；合并第一半成品和第二半成品，脫鹽濃縮，除菌過濾，冷凍真空干燥，即得糜蛋白酶成品。本發(fā)明解決了親和層析介質(zhì)昂貴，可重復使用次數(shù)少的缺點，適用于規(guī)?；笊a(chǎn)。