熒光探針檢測(cè)尿嘧啶-DNA糖基化酶活性的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011635433.6 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112760363A | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-05-07 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112760363A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-05-07 |
| 分類號(hào) | C12Q1/686(2018.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 烏拉迪斯拉夫 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 諸暨加向生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | - | 代理人 | - |
| 地址 | 311800浙江省紹興市諸暨市陶朱街道艮塔西路138號(hào)新金融大廈612 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種熒光探針檢測(cè)尿嘧啶?DNA糖基化酶活性的方法為在實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀中混合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)緩沖液、一個(gè)基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光DNA探針、尿嘧啶?DNA?糖基化酶，將反應(yīng)液在25℃?37℃培養(yǎng)30分鐘，而后在95℃加熱2分鐘，最后在25℃?37℃培養(yǎng)10分鐘，在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀的熒光測(cè)量通道為波長(zhǎng)520 nm處收集嘧啶?DNA糖基化酶活性數(shù)據(jù)；所述的基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光DNA探針為FAM?GCCAACCdUGGCTCT?BHQ1，其中,FAM為熒光報(bào)告基團(tuán)，BHQ1為熒光淬滅基團(tuán)；所述的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)緩沖液成份為T(mén)ris?HCl、KCl、MgCl2。具有簡(jiǎn)單高效的技術(shù)優(yōu)點(diǎn)。?? |
