粗品羊肝素鈉中羊和豬基因含量的qPCR檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910509895.4 申請日 -
公開（公告）號 CN112080553A 公開（公告）日 2020-12-15
申請公布號 CN112080553A 申請公布日 2020-12-15
分類號 C12Q1/6851;C12Q1/6806 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姚瑤;金永生;李小明;靳彩娟;姚亦明 申請（專利權(quán)）人 蘇州二葉制藥有限公司
代理機構(gòu) 南京蘇科專利代理有限責任公司 代理人 蘇州融析生物科技有限公司
地址 215126 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園C19樓5層507室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種粗品羊肝素鈉中羊和豬基因含量的qPCR檢測方法，通過處理粗品羊肝素鈉樣品，分別得到用于測量羊DNA和豬DNA的溶液；其中用于測量豬DNA的溶液采用單獨的試劑盒提取對豬DNA進行提??；并針對待測DNA溶液進行PCR擴增設計引物、PCR反應體系及PCR反應程序；最后分別使用羊DNA和豬DNA標準品制作相應的DNA含量標準曲線，利用PCR擴增制備的PCR模板，通過計算得到羊和豬DNA含量。本發(fā)明利用了TaqMan探針法進行檢測，靈敏度高、特異性好、操作簡單。通過肝素酶和硫酸軟骨素酶組合酶解粗品羊肝素鈉，有效解除了肝素、硫酸軟骨素和硫酸皮膚素對PCR反應的抑制；由于羊肝素鈉中豬DNA含量少，采用本發(fā)明提取方法，解決了微量豬DNA含量檢測準確性問題，效果顯著。