一種胎盤底蛻膜干細(xì)胞的分離方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010285897.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN111575229A 公開(kāi)（公告）日 2020-08-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN111575229A 申請(qǐng)公布日 2020-08-25
分類號(hào) C12N5/073 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李文東;宋云慶;黎波;盧瑞珊 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣東華夏健康生命科學(xué)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 顏希文
地址 510320 廣東省廣州市廣州國(guó)際生物島螺旋三路12號(hào)第八層801-805單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種胎盤底蛻膜干細(xì)胞的分離方法，屬于再生醫(yī)學(xué)和生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所述的胎盤底蛻膜干細(xì)胞的分離方法，包括如下步驟：采集胎盤浸泡于胎盤保存液含有1×?2×雙抗、10％高糖DMEM的基礎(chǔ)培養(yǎng)基PBS中；剝離底蛻膜，清洗；剪碎底蛻膜，用酶解液a含有0.25％胰酶和0.02％EDTA的DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行酶解后離心，棄上清液，再用酶解液b含有0.1?0.2mg/mL膠原酶Ⅳ、0.01?0.05mg/mL中性酶、5?10ng/mlFasligand抑制劑和5?10ng/mlsurvivin抑制劑的DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行酶解；然后分裝、計(jì)數(shù)和接種。本發(fā)明所述的胎盤底蛻膜干細(xì)胞的分離方法，采用了雙酶解法提取胎盤底蛻膜干細(xì)胞，該方法操作步驟簡(jiǎn)單，細(xì)胞獲取率高，提取的細(xì)胞數(shù)量足夠、細(xì)胞活率高。此外，本發(fā)明旨在全方位提取胎盤的底蛻膜干細(xì)胞。