適用于PacBio平臺(tái)的全長(zhǎng)擴(kuò)增子快速建庫(kù)方法、引物及測(cè)序方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010274612.5 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN111455023A | 公開（公告）日 | 2020-07-28 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111455023A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-07-28 |
| 分類號(hào) | C12Q1/6806(2018.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 方濤 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 武漢菲沙基因信息有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 武漢菲沙基因信息有限公司 |
| 地址 | 430000湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)樓B1棟 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種適用于PacBio平臺(tái)的全長(zhǎng)擴(kuò)增子快速建庫(kù)方法、引物及基于該建庫(kù)方法的全長(zhǎng)擴(kuò)增子測(cè)序方法。本發(fā)明針對(duì)全長(zhǎng)擴(kuò)增子測(cè)序需要進(jìn)行PCR的特性，結(jié)合PacBio測(cè)序平臺(tái)的啞鈴型文庫(kù)接頭結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)了具有通用結(jié)合序列的擴(kuò)增子引物、具有與通用結(jié)合序列匹配的啞鈴型引物，并基于這兩種特殊結(jié)構(gòu)的引物提出一種適用于PacBio平臺(tái)的全長(zhǎng)擴(kuò)增子快速建庫(kù)方法，通過(guò)該方法建庫(kù)，僅需在進(jìn)行常規(guī)擴(kuò)增后增加2個(gè)循環(huán)的環(huán)形引物擴(kuò)增，即可實(shí)現(xiàn)測(cè)序接頭的添加，同時(shí)，通過(guò)損傷修復(fù)酶的作用，使PCR產(chǎn)物成為適用于PacBio測(cè)序平臺(tái)的標(biāo)準(zhǔn)文庫(kù)。該方法將原有的PacBio標(biāo)準(zhǔn)建庫(kù)流程優(yōu)化為僅需一步擴(kuò)增與修復(fù)，極大的簡(jiǎn)化了全長(zhǎng)擴(kuò)增子的文庫(kù)構(gòu)建流程，顯著降低了測(cè)序成本。?? |
