適用于PacBio平臺(tái)的全長擴(kuò)增子快速建庫方法、引物及測序方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010274612.5 申請日 -
公開（公告）號 CN111455023A 公開（公告）日 2020-07-28
申請公布號 CN111455023A 申請公布日 2020-07-28
分類號 C12Q1/6806(2018.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 方濤 申請（專利權(quán)）人 武漢菲沙基因信息有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 武漢菲沙基因信息有限公司
地址 430000湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號武漢國家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)樓B1棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種適用于PacBio平臺(tái)的全長擴(kuò)增子快速建庫方法、引物及基于該建庫方法的全長擴(kuò)增子測序方法。本發(fā)明針對全長擴(kuò)增子測序需要進(jìn)行PCR的特性，結(jié)合PacBio測序平臺(tái)的啞鈴型文庫接頭結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)了具有通用結(jié)合序列的擴(kuò)增子引物、具有與通用結(jié)合序列匹配的啞鈴型引物，并基于這兩種特殊結(jié)構(gòu)的引物提出一種適用于PacBio平臺(tái)的全長擴(kuò)增子快速建庫方法，通過該方法建庫，僅需在進(jìn)行常規(guī)擴(kuò)增后增加2個(gè)循環(huán)的環(huán)形引物擴(kuò)增，即可實(shí)現(xiàn)測序接頭的添加，同時(shí)，通過損傷修復(fù)酶的作用，使PCR產(chǎn)物成為適用于PacBio測序平臺(tái)的標(biāo)準(zhǔn)文庫。該方法將原有的PacBio標(biāo)準(zhǔn)建庫流程優(yōu)化為僅需一步擴(kuò)增與修復(fù)，極大的簡化了全長擴(kuò)增子的文庫構(gòu)建流程，顯著降低了測序成本。??