一種提高重組人腦利鈉肽融合蛋白表達(dá)量的發(fā)酵工藝

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710479162.1 申請日 -
公開(公告)號 CN107177649B 公開(公告)日 2020-03-20
申請公布號 CN107177649B 申請公布日 2020-03-20
分類號 C12P21/02 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張艷;任東升;劉希望 申請(專利權(quán))人 西藏諾迪康藥業(yè)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都坤倫厚樸專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 西藏諾迪康藥業(yè)股份有限公司
地址 850000 西藏自治區(qū)拉薩市北京中路93號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種提高重組人腦利鈉肽融合蛋白表達(dá)量的發(fā)酵工藝,包括以下步驟:在發(fā)酵罐中,加入BHD培養(yǎng)基18~20L和甘油65~80mL,以及氨芐青霉素至其終濃度為100mg/L,接種,調(diào)節(jié)通氣量使發(fā)酵液中的溶氧量為30%~50%,調(diào)節(jié)pH值為6.8~7.2,培養(yǎng)溫度為37℃;當(dāng)OD600為10~15時,加入異丙基硫代半乳糖苷至其終濃度為0.5~1.0mmol/L誘導(dǎo),并向發(fā)酵罐內(nèi)流加150~300mL/h的補(bǔ)料液A,3~6h后停止發(fā)酵培養(yǎng),收獲細(xì)菌,即可。本發(fā)明發(fā)酵工藝,顯著提高了rhBNP融合蛋白的表達(dá)水平,其表達(dá)量高達(dá)34.5%~38.3%,具有良好的商業(yè)開發(fā)價值并取得了商業(yè)上的極大成功。