一種人皮膚組織來源成纖維細(xì)胞快速分離培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711281938.5 申請日 -
公開（公告）號 CN107779429A 公開（公告）日 2018-03-09
申請公布號 CN107779429A 申請公布日 2018-03-09
分類號 C12N5/077 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 戴博;聶蘇秦;郭康合;何婷婷;王波;董鳳嬌 申請（專利權(quán)）人 陜西九州生物醫(yī)藥科技集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 西安創(chuàng)知專利事務(wù)所 代理人 譚文琰
地址 710065 陜西省西安市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)科技六路196號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人皮膚組織來源成纖維細(xì)胞快速分離培養(yǎng)方法，該方法將成人或兒童術(shù)后遺棄的新鮮包皮組織清洗剪切后，依次采用分散酶II溶液和膠原酶IV溶液在37℃，水浴震蕩的條件下消化，再經(jīng)離心收集皮膚組織塊，用培養(yǎng)基重懸，在37℃，CO2體積濃度為5％的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明將分散酶II和膠原酶IV消化作用的溫度由4℃提高到37℃，兩種酶的活性均得到提高，通過水浴震蕩使兩種酶與對應(yīng)底物的接觸面積增大，有利于酶促反應(yīng)的進(jìn)行，從而大大縮短了兩種酶消化的時(shí)間，提高了成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)的速度；同時(shí)降低了酶對組織細(xì)胞的損傷，提高了細(xì)胞的貼壁率，得到的原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)6～8天即進(jìn)行傳代。