一種重組蛋白表達(dá)用工程菌株的構(gòu)建方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011156995.2 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112375774A | 公開（公告）日 | 2021-02-19 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112375774A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-02-19 |
| 分類號(hào) | C12N15/70(2006.01)I; | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 陳龍飛;應(yīng)躍斌;祝靜靜;宮麗穎;鞏尊洋;梁學(xué)軍 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 浙江新碼生物醫(yī)藥有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京沁優(yōu)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 郭峰 |
| 地址 | 312000浙江省紹興市濱海新城暢和路58號(hào)環(huán)保中心輔助樓2樓 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種重組蛋白表達(dá)用工程菌株的構(gòu)建方法，包括如下步驟，選擇大腸桿菌基因組上的硫氧還原蛋白和谷胱甘肽還原酶編碼基因(trxB和gor)為靶標(biāo)，利用CRISPR技術(shù)定點(diǎn)敲入含非天然氨基酸技術(shù)元件的同源重組片段，實(shí)現(xiàn)在無(wú)篩選標(biāo)記下的基因插入，得到重組蛋白表達(dá)用工程菌株，通過(guò)上述設(shè)置，本發(fā)明得到的菌株具備在重組蛋白表達(dá)時(shí)定點(diǎn)插入非天然氨基酸的能力，且消除了質(zhì)粒不穩(wěn)定的問(wèn)題，因此無(wú)需向發(fā)酵培養(yǎng)基中添加抗生素，在藥物的工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)中可應(yīng)用。?? |
