對(duì)血漿游離DNA進(jìn)行多目標(biāo)位點(diǎn)擴(kuò)增建庫(kù)的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201511021881.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105442054A 公開(kāi)（公告）日 2016-03-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN105442054A 申請(qǐng)公布日 2016-03-30
分類(lèi)號(hào) C40B50/06(2006.01)I 分類(lèi) 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 金谷雷;牛耀芳 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 杭州谷坤生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州中成專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 代理人 杭州谷坤生物技術(shù)有限公司
地址 310052 浙江省杭州市濱江區(qū)建業(yè)路511號(hào)華業(yè)大廈4樓437室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種對(duì)血漿游離DNA進(jìn)行多目標(biāo)位點(diǎn)擴(kuò)增建庫(kù)的方法，依次包括以下步驟：1)、末端修復(fù)和加A；2)、接頭連接：在步驟1)所得的末端加A的DNA片段中加入已退火形成環(huán)狀發(fā)夾結(jié)構(gòu)的接頭DNA，從而獲得兩側(cè)結(jié)合上環(huán)狀發(fā)夾接頭后的雙鏈DNA；當(dāng)步驟1)中提取純化的血漿游離DNA的量≤10ng時(shí)，進(jìn)行步驟3)；反之，當(dāng)步驟1)中提取純化的血漿游離DNA的量＞10ng時(shí)，直接進(jìn)行步驟4)；3)、在步驟2)所得的加好接頭的DNA中加入特異性引物I、Phi29酶和緩沖液，進(jìn)行線(xiàn)性擴(kuò)增；4)、PCR擴(kuò)增：所述擴(kuò)增產(chǎn)物構(gòu)成游離DNA突變位點(diǎn)富集測(cè)序文庫(kù)。