對血漿游離DNA進行多目標位點擴增建庫的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201511021881.6 申請日 -
公開（公告）號 CN105442054B 公開（公告）日 2018-04-03
申請公布號 CN105442054B 申請公布日 2018-04-03
分類號 C40B50/06 分類 組合技術〔8〕;
發(fā)明人 金谷雷;牛耀芳 申請（專利權）人 杭州谷坤生物技術有限公司
代理機構 杭州中成專利事務所有限公司 代理人 杭州谷坤生物技術有限公司
地址 310052 浙江省杭州市濱江區(qū)建業(yè)路511號華業(yè)大廈4樓437室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種對血漿游離DNA進行多目標位點擴增建庫的方法，依次包括以下步驟：1)、末端修復和加A；2)、接頭連接：在步驟1)所得的末端加A的DNA片段中加入已退火形成環(huán)狀發(fā)夾結構的接頭DNA，從而獲得兩側結合上環(huán)狀發(fā)夾接頭后的雙鏈DNA；當步驟1)中提取純化的血漿游離DNA的量≤10ng時，進行步驟3)；反之，當步驟1)中提取純化的血漿游離DNA的量＞10ng時，直接進行步驟4)；3)、在步驟2)所得的加好接頭的DNA中加入特異性引物I、Phi29酶和緩沖液，進行線性擴增；4)、PCR擴增：所述擴增產(chǎn)物構成游離DNA突變位點富集測序文庫。