基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應(yīng)用及固定化酶
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202210362600.7 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN114686467A | 公開（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN114686467A | 申請(qǐng)公布日 | 2022-07-01 |
| 分類號(hào) | C12N11/02（2006.01）I;C12N9/16（2006.01）I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 張桂敏;周晨;盧爭輝;向臘;巫攀 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 湖北大學(xué) |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | - |
| 地址 | 430062湖北省武漢市武昌區(qū)友誼大道368號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應(yīng)用及固定化酶。該方法將基底蛋白的核苷酸序列和目標(biāo)蛋白的核苷酸序列與斷裂型內(nèi)含肽兩端的核苷酸序列分別連接，連接后分別進(jìn)行融合表達(dá)；將融合表達(dá)后的基底蛋白制備成酶雜化納米花，使基底蛋白被固定化；將固定化后的基底蛋白與融合表達(dá)后的目標(biāo)蛋白混合，通過斷裂型內(nèi)含肽的反式自剪接功能直接進(jìn)行特異性自組裝，使目標(biāo)蛋白被間接固定化。該方法將斷裂型內(nèi)含肽和酶雜化納米花相結(jié)合，可將目標(biāo)蛋白的純酶或者粗酶液直接與固定化的基底蛋白結(jié)合，避免對(duì)蛋白構(gòu)象的影響，高效便捷。該方法制備玉米赤霉烯酮降解的固定化酶，具有良好穩(wěn)定性、催化效率和重復(fù)利用率。 |
