基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應用及固定化酶

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210362600.7 申請日 -
公開（公告）號 CN114686467A 公開（公告）日 2022-07-01
申請公布號 CN114686467A 申請公布日 2022-07-01
分類號 C12N11/02（2006.01）I;C12N9/16（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張桂敏;周晨;盧爭輝;向臘;巫攀 申請（專利權）人 湖北大學
代理機構 北京輕創(chuàng)知識產權代理有限公司 代理人 -
地址 430062湖北省武漢市武昌區(qū)友誼大道368號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物工程技術領域，具體涉及基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應用及固定化酶。該方法將基底蛋白的核苷酸序列和目標蛋白的核苷酸序列與斷裂型內含肽兩端的核苷酸序列分別連接，連接后分別進行融合表達；將融合表達后的基底蛋白制備成酶雜化納米花，使基底蛋白被固定化；將固定化后的基底蛋白與融合表達后的目標蛋白混合，通過斷裂型內含肽的反式自剪接功能直接進行特異性自組裝，使目標蛋白被間接固定化。該方法將斷裂型內含肽和酶雜化納米花相結合，可將目標蛋白的純酶或者粗酶液直接與固定化的基底蛋白結合，避免對蛋白構象的影響，高效便捷。該方法制備玉米赤霉烯酮降解的固定化酶，具有良好穩(wěn)定性、催化效率和重復利用率。