一種用于生產(chǎn)重組人IL-1ra的工程菌株及制備方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111110017.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113957026A 公開（公告）日 2022-01-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN113957026A 申請(qǐng)公布日 2022-01-21
分類號(hào) C12N1/21（2006.01）I;C12N15/11（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I;C07K14/47（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王苗穎;莫曉寧;馬大龍;范中玉;李強(qiáng);盧鍵;趙建權(quán);雷苑;李冬梅;盧文娜 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京君泰聯(lián)合科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 張紅艷
地址 100023北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號(hào)院6號(hào)樓3單元306室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種用于生產(chǎn)重組人IL?1ra的工程菌株及制備方法和應(yīng)用，該工程菌株的制備方法包括以下步驟：1）載體的選擇及改造：選用大腸桿菌載體pKpL?3a進(jìn)行改造；2）構(gòu)建rhIL?1ra表達(dá)質(zhì)粒：將rhIL?1ra的基因序列連接到步驟（1）獲得的構(gòu)建好的空載體上；用DNA連接酶進(jìn)行連接；連接產(chǎn)物直接轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞，構(gòu)建工程菌株；3）構(gòu)建工程菌株及表達(dá)。采用本發(fā)明方法構(gòu)建的工程菌株表達(dá)量達(dá)到20?40%以上，且無支原體、衣原體感染，不使用青霉素或大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，不使用IPTG作為誘導(dǎo)劑，符合藥品生產(chǎn)的要求，符合大規(guī)模、工業(yè)化生產(chǎn)蛋白的需求。