一種新型腺病毒包裝方法在CRISPR/Cas9基因編輯方法中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910327804.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110055278A 公開（公告）日 2019-07-26
申請(qǐng)公布號(hào) CN110055278A 申請(qǐng)公布日 2019-07-26
分類號(hào) C12N15/861;C12N15/65;C12N15/90;C12N7/01 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姬廣聚;楊智廣;顧磊;王會(huì)文;黃雪;黃海軍;李靜 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 中科廣聚（北京）生物醫(yī)學(xué)技術(shù)中心有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京悅和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 田昕
地址 100039 北京市海淀區(qū)永定路乙1號(hào)院1號(hào)樓三層3018
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實(shí)施例涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種新型腺病毒包裝方法在CRISPR/Cas9基因編輯方法中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的腺病毒包裝方法采用在體外進(jìn)行連接的方法得到重組載體，避免了傳統(tǒng)pAdEasy系統(tǒng)使用電轉(zhuǎn)法使pAdEasy和穿梭質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)發(fā)生同源重組的步驟，步驟簡(jiǎn)單，成功率高，且節(jié)省了腺病毒包裝的時(shí)間，包裝效率高，省時(shí)高效。本發(fā)明針對(duì)CRISPR/Cas9技術(shù)，設(shè)計(jì)了可用于新型腺病毒包裝方法的pBlue?DsRed?Cas9和pBlue?EGFP?sgRNA等載體。對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)，只需改變pBlue?EGFP?sgRNA載體中sgRNA序列，pBlue?DsRed?Cas9載體可作為通用載體用于不同基因的編輯。本發(fā)明提供的新型腺病毒包裝方法包裝得到的腺病毒，用于CRISPR/Cas9技術(shù)，基因編輯效率高。