一種用于擴(kuò)增重組犬腺病毒CAV2的穩(wěn)定細(xì)胞系MDCK及其構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810095598.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108342362A 公開（公告）日 2018-07-31
申請(qǐng)公布號(hào) CN108342362A 申請(qǐng)公布日 2018-07-31
分類號(hào) C12N5/10;C12N15/867;C12N7/00;C12N15/65;C12R1/91 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 潘杏;李良鳳;高娟;楊甜;黃曉蘋 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢樞密腦科學(xué)技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢東喻專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 紀(jì)元
地址 430000 湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷七路128號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種表達(dá)犬腺病毒E1A基因和E1B基因的穩(wěn)定細(xì)胞系、其構(gòu)建方法和應(yīng)用，通過(guò)將E1區(qū)的兩個(gè)基因E1A和E1B分別構(gòu)建到慢病毒載體中，然后讓MDCK細(xì)胞分別穩(wěn)定的表達(dá)E1A和E1B基因，構(gòu)建了MDCK?E1A?E1B的穩(wěn)定細(xì)胞系。本發(fā)明將片段較長(zhǎng)不易構(gòu)建的E1基因拆成了兩段片段較短易于構(gòu)建的E1A和E1B基因，提高了構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞的成功率；E1A和E1B基因分別帶有不同顏色的熒光蛋白，便于實(shí)時(shí)監(jiān)控穩(wěn)定細(xì)胞的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)證明MDCK?E1A?E1B穩(wěn)定細(xì)胞系比MDCK?E1穩(wěn)定細(xì)胞系擴(kuò)增犬腺病毒滴度更高，為犬腺病毒在病毒活載體疫苗、基因治療、癌癥治療等領(lǐng)域的應(yīng)用上奠定了很好的基礎(chǔ)。