一種利用質(zhì)粒輔助進(jìn)行rAAV感染滴度檢測的方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> 2020111966730 申請日 -
公開（公告）號 CN112280801A 公開（公告）日 2021-01-29
申請公布號 CN112280801A 申請公布日 2021-01-29
分類號 C12N15/85(2006.01)I; 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 潘杏;何曉斌;劉光猛;張勝;賈寧;王夢蝶 申請（專利權(quán)）人 武漢樞密腦科學(xué)技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢華之喻知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
地址 430223湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷七路128號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物學(xué)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種利用質(zhì)粒輔助進(jìn)行rAAV感染滴度檢測的方法及試劑盒。其通過對攜帶有E1a基因和E1b基因的HEK細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染包含編碼AAV病毒Cap、Rep蛋白的基因質(zhì)粒以及腺病毒輔助質(zhì)粒的外源質(zhì)粒，以該待測rAAV作為種子病毒，在轉(zhuǎn)染外源質(zhì)粒的HEK細(xì)胞中實現(xiàn)rAAV的復(fù)制和增殖；通過檢測報告基因的表達(dá)或檢測該細(xì)胞中復(fù)制和增殖產(chǎn)生的的rAAV基因組拷貝數(shù)，計算待測rAAV的感染滴度，不需引入輔助病毒，通過質(zhì)粒輔助即可高效簡單實現(xiàn)rAAV感染滴度的檢測，由此解決現(xiàn)有技術(shù)rAAV感染滴度檢測方法需要引入輔助病毒存在安全風(fēng)險，且需要配合包裝特定細(xì)胞系操作復(fù)雜等技術(shù)問題。??