一種免疫缺陷大鼠模型的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710065515.3 申請日 -
公開（公告）號 CN106755115A 公開（公告）日 2017-05-31
申請公布號 CN106755115A 申請公布日 2017-05-31
分類號 C12N15/89(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐洋 申請（專利權(quán)）人 廣東圣賽生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京東正專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 南方醫(yī)科大學(xué);廣東圣賽生物科技有限公司
地址 510000 廣東省廣州市白云區(qū)沙太南路1023號-1063號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種免疫缺陷大鼠模型的構(gòu)建方法，包括以下步驟：將針對大鼠DNA的Prkdc和IL2Rγ基因敲除的gRNA分別進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄，再分別與體外轉(zhuǎn)錄的CAS9蛋白mRNA混合，凍存于無RNA酶的超純水中，得到相應(yīng)的注射液A及B；將人SIRPa基因組DNA擴(kuò)增，純化，凍存于無RNA酶的超純水中，得注射液C；采用顯微注射法將注射液A和B分別注射進(jìn)不同的大鼠受精卵的胞質(zhì)中，將注射液C注射進(jìn)另一大鼠受精卵的原核中，將三種受精卵移植入不同假孕雌鼠體內(nèi)，培育分別得到第二代大鼠A，B和C；將第二代大鼠A、B和C進(jìn)行雜交，繁殖F1代；再將F1代進(jìn)行雜交，得到敲除了IL2Rγ和Prkdc基因并轉(zhuǎn)入了人SIRPa基因的免疫缺陷大鼠模型。該大鼠模型可以讓人類細(xì)胞高效植入，符合試驗指標(biāo)，品系背景純正。