測(cè)定生物樣本中特異位點(diǎn)DNA甲基化水平的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810665835.7 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110643702A 公開（公告）日 2020-01-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN110643702A 申請(qǐng)公布日 2020-01-03
分類號(hào) C12Q1/6886（2018.01）; C12Q1/6883（2018.01） 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡立夫; 陳琦; 梁昊原; 谷東風(fēng); 周曉瑩 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市圣必智科技開發(fā)有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 518057 廣東省深圳市南山區(qū)科技園南區(qū)高新南七道數(shù)字技術(shù)園B1棟3樓A區(qū)2-2號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種測(cè)定生物樣本中特異位點(diǎn)DNA甲基化水平的方法及其應(yīng)用。該方法包括步驟：獲取生物樣本，并提取生物樣本中的待測(cè)DNA片段；修飾待測(cè)DNA片段，將待測(cè)DNA片段中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變成尿嘧啶；以修飾后的DNA片段為模板DNA片段，以第一引物和第二引物分別從模板DNA片段兩側(cè)對(duì)模板DNA片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增；處理經(jīng)過PCR擴(kuò)增后的PCR產(chǎn)物，去除多余的第一引物、第二引物和dNTPs，并純化回收；檢測(cè)待測(cè)DNA片段CpG位點(diǎn)的甲基化和去甲基化熒光偏振值；根據(jù)待測(cè)DNA片段CpG位點(diǎn)的甲基化和去甲基化熒光偏振值計(jì)算待測(cè)DNA片段的甲基化水平。實(shí)施本發(fā)明，具有簡(jiǎn)便、快捷、高通量、低成本、無需分離純化等優(yōu)點(diǎn)，適合大量檢測(cè)臨床珍貴的低濃度DNA樣本的甲基化。