一種去除百日咳組分菌毛蛋白2/3內(nèi)毒素的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910757403.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110358802B 公開（公告）日 2021-06-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN110358802B 申請(qǐng)公布日 2021-06-18
分類號(hào) C12P21/02;C07K14/23;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;C12R1/01 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王長永;王夢(mèng)舒;徐艷艷;梁洪野;閆慧;原秀娟 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 長春百克生物科技股份公司
代理機(jī)構(gòu) 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉猛
地址 130000 吉林省長春市高新開發(fā)區(qū)火炬路1260號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種去除百日咳組分菌毛蛋白2/3內(nèi)毒素的方法。本方法將百日咳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)后，離心收集菌體，菌體用尿素磷酸鹽緩沖液抽提；離心收集上清，使用PEG?8000和硫酸銨分別進(jìn)行沉淀；沉淀使用磷酸鹽緩沖液抽提，然后離心收集上清液，采用Q?Sepharose層析柱處理，使用含氯化鈉的磷酸鹽緩沖液洗脫出Fim2/3組分。本發(fā)明聯(lián)合PEG8000沉淀、硫酸銨沉淀和Q?Sepharose層析柱處理三個(gè)操作，通過多重手段去除菌毛蛋白Fim2/3中的內(nèi)毒素，可以在不帶入外源物質(zhì)的前提下，保持有效成分Fim2/3生物活性和回收率，同時(shí)將Fim2/3中的內(nèi)毒素去除至10EU/mg以下。